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西藏牦牛牛支原体的分离鉴定及其生长特性、耐药性分析

中国农业大学学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为确定引起西藏牦牛常发多发肺炎的细菌病原体,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通过病原分离培养、菌落形态观察、生化试验和PCR鉴定等方法进行细菌检测;通过OD630和pH变化对分离株进行生长曲线测定;采用K-B纸片法进行药物敏感性试验.结果显示:从145份牦牛鼻腔粘液中分离得到10株牛支原体;分离株菌落形态和生化试验结果均符合牛支原体的生物学特性;通过PCR分别扩增得到238bp的uvrC特异性基因与1 500bp16SrRNA基因.10株分离株间的uvrC特异性基因和16SrRNA基因序列同源性较高,均与国际标准株PG45有高度同源性,uvrC特异性基因序列和16SrRNA基因序列与国际标准株PG45的同源性分别为98.4%~100%和99.1%~99.9%.生长曲线测定表明,分离株在PPLO培养基中培养24h内为迟缓期,培养42h后开始进入稳定期,78h后开始进入衰亡期;3个分离株培养物的平均pH随着培养时间延长不断降低,其中24~42h期间pH下降最快,随后下降速度减慢,至78h后几乎不再变化.药物敏感性试验表明,分离株对大环内酯类、氨基糖苷类和林可胺类等药物均存在不同程度的耐药,但对强力霉素和卡那霉素敏感或中度敏感.

关键词: 西藏牦牛 牛支原体 分离鉴定 生长曲线 耐药性

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西藏尼玛县羊传染性脓疱病毒B2L和F1L基因的遗传进化分析

动物医学进展 2020 北大核心 CSCD

摘要:为研究西藏尼玛县羊传染性脓疱病毒遗传进化现状,采集了西藏尼玛县内某养殖户中疑似患羊传染性脓疱的患羊唇部分泌物,采用病毒分离、PCR、基因克隆、测序等技术,将分离株的B2L、F1L和ORF020基因与GenBank公布的部分流行株相应序列进行对比分析.结果显示,B2L基因在核苷酸水平显示96.4%~98%的同源性,与吉林分离株(MG712417)的同源性最高,为98%,与广东分离株(KY053526)的亲缘关系最近,同源性为97.9%;F1L基因在核苷酸水平显示95.3%~97.5%的同源性,与陕西分离株(KJ139957)的亲缘关系最近,同源性为97.5%;ORF020基因在核苷酸水平显示95.1%~99.5%的同源性,与陕西分离株(KJ139958)亲缘关系最近,同源性为99.5%.基于B2L、F1L、ORF020遗传进化分析表明,CPDV在不同地理环境和宿主中存在基因差异,但总体表现出保守性,同时表明西藏尼玛县境内CPDV流行的复杂性,研究结果可为该地区CPDV防控等相关研究提供参考.

关键词: 羊传染性脓疱病毒 B2L基因 F1L基因 遗传进化

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西藏黄花蒿内生真菌分离与鉴定

动物医学进展 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探讨西藏黄花蒿内生真菌种类与种群分布情况,对采集于西藏曲水的黄花蒿样品,用表面消毒法对样品消毒后进行内生真菌分离,获得36株内生真菌.通过形态学和rDNA-ITS序列分析技术对所得菌株进行种属鉴定,并通过MEGA软件进行系统进化分析.结果表明,西藏地区黄花蒿内生真菌丰富,从其根、茎、叶和花组织中共分离到36株内生真菌,总相对分离频率为91.67%.其中链格孢菌属(Alternaria sp.)在黄花蒿植株内分离频率最高,为优势菌属.拟壳多孢属(Stagonosporopsis sp.)存在于根、茎和叶中,分布最广.研究结果丰富了黄花蒿内生真菌种群多样性,并为产青蒿素内生真菌筛选奠定了基础.

关键词: 内生真菌 黄花蒿 分离鉴定 链格孢菌属

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PEG模拟干旱胁迫西藏甘蓝型春油菜芽期根系特征及抗旱性研究

广东农业科学 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]了解干旱胁迫对西藏甘蓝型春油菜根系形态的影响以及与抗旱性的关系,筛选抗旱性春油菜品种(系).[方法]以石英砂为基质,采用15%(W/V)PEG溶液模拟干旱胁迫研究西藏甘蓝型春油菜芽期根系特征与抗旱性关系,筛选抗旱性春油菜品种(系).[结果]干旱胁迫对西藏甘蓝型春油菜相对根重及相对根冠比影响较大,对根长影响最小;自育材料与中国内地引进品种材料抗旱性无差异;相关性分析显示,相对活力指数与相对侧根数(r2=0.443*)、相对根长(r2=0.555*)呈极显著正相关;对28份春油菜品种(系)聚类分析显示,在欧式距离11处可分为5类群,A类抗旱性最强,平均相对侧根数为69.14、平均相对根长为96.09%、平均相对根重为52.58%、平均相对根冠比为63.16%、平均相对活力指数为0.59.[结论]相对侧根数、相对根长及相对活力指数可以作为甘蓝型春油菜抗旱鉴定指标,其他指标可作为辅助.结合相对活力指数及聚类分析,筛选到3份材料(158106-2、164046-2、188013-1)抗旱性最强.

关键词: PEG溶液 干旱胁迫 甘蓝型春油菜 芽期 抗旱性 根系 西藏

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西藏地区青稞籽粒营养品质分析及评价

麦类作物学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探明西藏地区青稞品种间的性状差异及性状间的相关性,筛选优异品质青稞种质,以251个西藏青稞种质资源为材料,测定了籽粒淀粉、粗蛋白、β-葡聚糖、γ-氨基丁酸、大量元素(Ca、P)、微量元素(Fe、Zn、Se)含量共9个品质指标,分析了被测指标间关系.结果表明,所测定的9项品质指标在供试种质资源间均存在不同程度的差异,淀粉含量的变异系数最小,Se含量的变异系数最大;粗蛋白与淀粉含量呈极显著负相关(r=-0.54),粗蛋白与γ氨基丁酸、Ca、P、Zn、Fe含量均呈极显著正相关.对被测指标进行主成分分析发现,可将9项品质指标简化成3个主成分,其累积方差贡献率为74.5%,其中第一主成分因子的贡献率达到了48.0%,第一主成分中因子载荷量大的品质指标是Zn、P、Ca、粗蛋白、γ-氨基丁酸、淀粉、Fe含量.综合评价筛选出10个营养品质较高的种质,分别为BJX152、BJX008、BJX149、BJX004、BJX003、BJX015、BJX005、藏青2000、BJX227、喜马拉22号.

关键词: 青稞 营养品质 多样性 作物改良

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液相色谱串联质谱分析肉鸡毛发中诺氟沙星残留

分析试验室 2020 北大核心 CSCD

摘要:建立了一种适用于肉鸡毛发中诺氟沙星残留分析的方法。毛发样品经医用纱布包裹后清洗,剪碎后加入4 mol/L氨水超声提取,Oasis HLB修饰磁纳米材料用于净化提取液,采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱分离,电喷雾正离子源进行离子化,多反应监测方式(MRM)对诺氟沙星的母离子及子离子进行监测,三重四极杆质谱测定。该方法鸡毛中诺氟沙星在1. 0~100. 0$g/kg范围线性良好,相关系数为0. 9928;诺氟沙星检出限为0. 3$g/kg,定量限为1. 0$g/kg,方法回收率为89. 2%~95. 7%;相对标准偏差(RSDs)均小于10%。方法可满足政府和企业在肉鸡饲养期间对诺氟沙星的监控需求。

关键词: 诺氟沙星 鸡毛 检测 液相色谱串联质谱

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西藏高原主要麦类作物真菌毒素污染与产毒真菌分布研究

麦类作物学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探明西藏麦类作物中真菌毒素污染程度及产毒真菌种类与分布,以青稞、小麦为研究对象,对其籽粒中多种毒素进行分析,并对毒素污染阳性样品进行真菌分离鉴定.结果表明,2018年毒素总检出率为20.13%;杂色曲霉毒素检出率最高,为10.74%;OTA超标率最高,为3.36%;小麦的毒素检出率和超标率都高于青稞,二者的污染毒素种类以OTA、ZEN、ST为主.西藏高原42份被真菌毒素污染的农作物籽粒中共分离到199份真菌,分属23属67种真菌,青霉属为优势属,曲霉属次之.

关键词: 真菌毒素 产毒真菌 污染分布 西藏

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不同氮源对白腐真菌发酵秸秆营养价值的影响

四川农业大学学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]研究不同氮源对白腐真菌发酵秸秆营养价值及其产酶活性的影响.[方法]采用正交实验设计,选取漏斗状侧耳(Pleurotus sajor-caju),黄白侧耳(Pleurotus cornucopiae)和糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)3种侧耳属白腐真菌作为发酵菌种,选取尿素,草酸铵和氯化铵作为发酵基质的氮源,共九个处理,每个处理3个重复,25℃固态发酵20 d,测定发酵底物的营养指标及产酶活性.[结果]黄白侧耳尿素组显著提高(P<0.05)玉米秸秆中中性洗涤纤维(neutral detergent fiber)、酸性洗涤纤维(acid detergent fibe)、半纤维素(hemicellulose)、纤维素(cellulose)、酸性洗涤木质素(acid detergent lignin)的损失率.漏斗状侧耳草酸铵组显著提高(P<0.05)发酵的玉米秸秆中NDF、ADF、HL、CL、ADL含量的损失率;糙皮侧耳氯化铵组显著提高(P<0.05)发酵的玉米秸秆中NDF、ADF、HL、CL含量的损失率.黄白侧耳尿素组漆酶(laccase)、木质素过氧化物酶(lignin peroxidase)和锰过氧化物酶(manganese peroxidase)的活性显著提高(P<0.05);漏斗状侧耳草酸铵组Lac、Lip和Mnp的活性显著提高(P<0.05);黄白侧耳氯化铵组和糙皮侧耳氯化铵组Lip的活性显著提高(P<0.05).[结论]通过对营养物质损失率及相关酶活性分析可知,尿素处理黄白侧耳、草酸铵处理漏斗状侧耳、氯化铵处理糙皮侧耳效果最好.白腐真菌产酶活性和玉米秸秆中木质纤维素损失率存在极显著(P<0.01)的交互作用.产酶活性较高的木质纤维素降解率也较高,可改善秸秆的营养价值,成正相关关系.氮的来源对白腐菌产酶活性及发酵秸秆营养价值有显著影响,这将为推进秸秆饲料化的进程提供理论依据.

关键词: 氮源 白腐真菌 玉米秸秆 营养价值 木质纤维素酶

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饲料蛋白质水平对异齿裂腹鱼生长、消化酶活性、非特异性免疫及 蛋白质代谢反应的影响

水生生物学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为研究饲料中不同蛋白质水平对异齿裂腹鱼(Schizothorax)生长、消化酶活性、非特异性免疫及蛋白质代谢反应的影响,配制蛋白质水平为20.01%、25.00%、30.19%、35.24%、40.12%和45.10%的6种等脂等能的饲料.选取初始体重为(115.46±16.20)g的异齿裂腹鱼540尾,随机分成6组,每组3个重复,每个重复30尾,进行为期94d的饲养试验.结果表明:随着饲料蛋白水平升高,异齿裂腹鱼末重(FW)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR)均先升高后降低,且在蛋白水平为40.12%时最大,与30.19%组差异不显著(P>0.05);蛋白质效率(PER)、成活率(SR)均呈先升高后下降趋势,在蛋白水平为25.00%时最大,与30.19%组差异不显著(P>0.05);摄食率(FR)先降低后趋于稳定,在蛋白水平为20.01%时最高,显著高于其余试验组(P<0.05);饲料系数(FCR)和肝体比(HSI)均呈先降低后升高的变化趋势,在蛋白质水平为40.12%时最低,与35.24%组差异不显著(P>0.05);全鱼粗蛋白质显著升高(P<0.05);胰蛋白酶(TPS)、脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)活性变化趋势基本与SGR、WGR和PER相一致,且TPS>LPS>AMS;肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性逐渐升高,在45.10%组最高,与30.19%—40.12%组差异不显著(P>0.05),谷丙转氨酶(ALT)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性先升高后降低,ALT和ACP活性在35.24%组高、AKP活性在30.19%组最高,但各试验组差异不显著(P>0.05);血清中的尿素氮显著上升(P<0.05);血清中的血氨在45.10%组最大,显著高于25.00%组(P<0.05).异齿裂腹鱼WGR、SGR、FCR、PER与不同蛋白质水平分别进行二次回归分析得,在试验条件下,异齿裂腹鱼饲料中最佳蛋白质水平为31.20%—34.02%.

关键词: 异齿裂腹鱼 蛋白质水平 生长 消化酶活性 非特异性免疫 蛋白质代谢

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西藏那曲市牦牛源莫拉杆菌的分离鉴定与敏感药物筛选

中国预防兽医学报 2020 北大核心 CSCD

摘要:为了解西藏那曲牦牛莫拉杆菌的感染及耐药情况,本研究无菌采集具有体温升高、眼睛红肿、持续性流泪、眼角黄色脓液、失明等临床症状牦牛的28份鼻拭子和30份眼拭子样品,经细菌的分离纯化、革兰氏染色、生化试验鉴定结果初步表明,本研究从牦牛鼻拭子样品中里分离出了2株莫拉杆菌.并经16S rRNA的PCR扩增及其序列分析结果显示,该基因序列与GenBank登录的其它莫拉杆菌相应基因序列的同源性为97%~ 100%;该基因进化树结果显示,分离株与莫拉杆菌(DQ153089.1和NR 043583.2)聚为一支,进一步表明本研究分离的2株细菌均为莫拉杆菌,患病牦牛的红眼病是由该菌感染引起.药敏试验结果显示该菌对环丙沙星、氧氟沙星、红霉素、新霉素、丁胺卡那及诺氟沙星6种抗生素高度敏感,而对临床上常用的青霉素、卡那霉素、庆大霉素、复方新诺明和多西环素5种抗生素均耐药.本研究为那曲及其他牧区、半农半牧区的牦牛传染性角膜结膜炎的用药提供了参考依据.

关键词: 莫拉杆菌 西藏那曲 分离鉴定 药敏试验 抗生素

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