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犬细小病毒VP2主要抗原表位基因的密码子优化及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 曹涵文 1 ; 许锦聪 2 ; 李颖 2 ; 梁学武 2 ;

作者机构： 1.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所

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关键词： 犬细小病毒;抗原表位基因;密码子优化;克隆;原核表达;融合蛋白

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2018 年 19 期

页码： 118-121

收录情况： 北大核心

摘要： 为了制备大量廉价的可溶性犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验截选了VP2抗原表位集中的基因片段VP2-70进行密码子优化及合成,将合成基因克隆到pET-32a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-VP2-70,转化BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化,Western-blot检测验证其生物学活性。结果表明:试验构建的VP2-70表达载体能够介导VP2-70融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达量高出野生型VP2-70融合蛋白16 mg/L;Western-blot检测显示,该蛋白具有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。

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