科研产出
鲊辣椒生香酵母的分离筛选鉴定及其应用研究
《食品与发酵工业 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：从自然发酵鲊辣椒中以嗅闻法结合总酯含量作为生香酵母的筛选依据分离筛选到1株生香酵母，经鉴定并分类命名为库德里阿兹威氏毕赤酵母菌(Pichia kudriavzevii)Y50,为探究该菌株混菌发酵生产鲊辣椒的品质提升作用，将Y50与植物乳杆菌混合发酵鲊辣椒(C),以自然发酵的鲊辣椒(A)以及接种植物乳杆菌发酵的鲊辣椒(B)为对比研究对象，对3种鲊辣椒的基本理化指标、辣椒碱、有机酸和挥发性成分进行比较分析。结果表明，3种鲊辣椒pH值、总酸、亚硝酸盐、胡萝卜素含量较为接近，但鲊辣椒C中有机酸含量达(25.46±0.32) g/kg,比鲊辣椒A和鲊辣椒B分别高出57.8%和32.2%。鲊辣椒A、B、C中分别检出挥发性风味物质90种、67种和72种，其中鲊辣椒C的挥发性物质含量最高，为(10 101.11±99.04)μg/kg,酯类、醇类、醛类、酸类挥发性物质含量均有提高，相比A、B分别提升了75%、358%、106%、23%和102%、59%、68%、51%,赋予鲊辣椒更浓郁的酯香、花香和果香，说明添加生香酵母Y50能提升鲊辣椒整体的风味品质，通过气味活度值(odor activity value, OAV)的计算，共检出22种OAV>1的香气化合物，这些关键香味物质赋予了鲊辣椒特有的香气特征，其中β-紫罗兰酮、2-甲基丁酸乙酯、己酸己酯、正庚醇、(+)-柠檬烯、庚醛、愈创木酚是构成鲊辣椒C风味的关键物质。试验表明Y50具有进一步应用于鲊辣椒生产的潜力。
关键词： 鲊辣椒 生香酵母 分离鉴定 混菌发酵 有机酸 挥发性成分 香气活度值
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牦牛源链球菌的分离鉴定及耐药性分析
《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】了解西藏拉萨地区牦牛链球菌的感染情况、致病性及其耐药性，为牦牛源链球菌的研究提供新的数据。【方法】对55份牦牛鼻拭子进行细菌分离培养、菌落形态观察、革兰氏染色镜检、生化鉴定、16S rRNA序列PCR扩增以鉴定分离菌的种属特性。通过人工感染试验小鼠评价分离菌的致病性，采用药敏纸片扩散法检测分离菌的耐药性。【结果】分离菌在血平板上长出灰白色、表面光滑的α溶血圆形菌落，革兰氏染色镜检呈链状排列的阳性球菌。分离菌可发酵葡萄糖、乳糖、海藻糖和山梨醇，不发酵麦芽糖和甘油，硝酸盐还原试验、靛基质试验、V-P试验和MR试验均呈阴性。经16S rRNA基因序列比对分析，确定有25株链球菌（Tibet-1～Tibet-25）,检出率为45.46%（25/55）,其中17株多动物链球菌，8株马链球菌。分离菌16S rRNA基因序列与NCBI上已发布的链球菌相似性在97.04%～99.77%之间，其中Tibet-1、Tibet-2、Tibet-3、Tibet-5、Tibet-9、Tibet-10、Tibet-11、Tibet-14、Tibet-15、Tibet-16、Tibet-17共11株牦牛源多动物链球菌与KM981770.1的相似性均在99%以上。分离的牦牛源链球菌可引起小鼠腹泻，对发病小鼠脏器进行增菌培养，均可分离到链球菌。药敏试验结果显示，分离菌株对多西环素、红霉素、青霉素共11种抗菌药敏感，对复方新诺明耐药。【结论】本研究分离了牦牛源多动物链球菌和牦牛源马链球菌，并对其致病性和耐药性进行相关分析，为该病的防控和治疗提供了参考依据。
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日喀则藏羊源金黄色葡萄球菌的分离鉴定和药物敏感性分析
《中国兽医杂志 》 2023 北大核心
摘要：为了诊断西藏自治区日喀则市某牧场养殖藏羊的死亡病因，本试验无菌采集病死羊的心脏、肝脏、肺脏和肾脏病变组织进行细菌分离纯化，染色镜检和生化鉴定，16S rDNA序列分析，并对分离菌株进行药敏试验。结果显示，分离菌株革兰染色镜检呈葡萄串状或单个短链成对排列，可分解糖类，MR-VP结果为阳性，16S rDNA测序结果与GenBank上登录的其他金黄色葡萄球菌16S rDNA基因序列的同源性达98%以上，证明所分离菌株为金黄色葡萄球菌；药敏试验结果显示，分离菌株对部分喹诺酮类和头孢类抗生素、庆大霉素、复方新诺明、万古霉素和氯霉素高度敏感，对头孢他啶和多西环素呈中介耐药，而对氨苄西林、多黏菌素B、四环素、新霉素、卡那霉素、青霉素、克林霉素和红霉素共8种抗菌药呈耐药。本试验为日喀则地区羊源金黄色葡萄球菌的用药和治疗提供了参考依据。
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亚东鲑细菌性鳃病病原菌的分离鉴定
《水产科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：2020年9月西藏自治区日喀则市亚东县某养殖基地的亚东鲑出现鳃病症状，主要临床症状为鳃盖打开、鳃丝充血、病鱼离群和呼吸困难。为探究此次疾病的病因，寻找其治疗方法，自患有鳃病症状亚东鲑的鳃组织中分离到1株优势菌YDX-1，采用常规细菌分析、16S rRNA基因序列比对分析和人工感染试验等方法对此株优势菌进行鉴定，同时探究菌株YDX-1的耐药性。结果表明，菌株YDX-1为革兰氏阴性菌，在16S rRNA基因序列比对构建的系统发育树中，其与杀鲑气单胞菌聚为一支，相似度达99%以上，结合该菌的形态学特征、生化特性和测序鉴定结果，综合鉴定菌株YDX-1为杀鲑气单胞菌。通过人工感染试验发现，杀鲑气单胞菌YDX-1对亚东鲑的致死率较高，且该菌具有传染性。药敏试验结果显示，杀鲑气单胞菌YDX-1对使用的6类（21种）药物普遍敏感，仅对复方新诺明不敏感。本试验结果对西藏地区亚东鲑细菌性鳃病的防治具有指导意义。
关键词： 亚东鲑 细菌性鳃病 分离鉴定 杀鲑气单胞菌 药敏试验
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那曲市1株牦牛源溶血性曼氏杆菌的分离鉴定与耐药性分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为探究那曲市某牦牛养殖场病牛发病的主要原因,试验在该养殖场无菌采集10份患病牦牛的鼻拭子,对所采集的鼻拭子进行细菌分离培养与鉴定,并对分离细菌进行药敏试验。结果表明:分离纯化的细菌为革兰氏阴性短杆菌,生化试验初步鉴定为溶血性曼氏杆菌,测序结果与GenBank中其他溶血性曼氏杆菌比对,基因相似性为97%～98%;分离菌株对环丙沙星、氧氟沙星、红霉素、新霉素、丁胺卡那、头孢唑啉、四环素7种药物高度敏感,而对复方新诺明、多西环素、卡那霉素、青霉素、苯唑西林,庆大霉素耐药。说明该养殖场牦牛感染了溶血性曼氏杆菌,且该菌具有一定的耐药性。
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西藏牦牛牛支原体的分离鉴定及其生长特性、耐药性分析
《中国农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为确定引起西藏牦牛常发多发肺炎的细菌病原体,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通过病原分离培养、菌落形态观察、生化试验和PCR鉴定等方法进行细菌检测;通过OD630和pH变化对分离株进行生长曲线测定;采用K-B纸片法进行药物敏感性试验.结果显示:从145份牦牛鼻腔粘液中分离得到10株牛支原体;分离株菌落形态和生化试验结果均符合牛支原体的生物学特性;通过PCR分别扩增得到238bp的uvrC特异性基因与1 500bp16SrRNA基因.10株分离株间的uvrC特异性基因和16SrRNA基因序列同源性较高,均与国际标准株PG45有高度同源性,uvrC特异性基因序列和16SrRNA基因序列与国际标准株PG45的同源性分别为98.4%~100%和99.1%~99.9%.生长曲线测定表明,分离株在PPLO培养基中培养24h内为迟缓期,培养42h后开始进入稳定期,78h后开始进入衰亡期;3个分离株培养物的平均pH随着培养时间延长不断降低,其中24~42h期间pH下降最快,随后下降速度减慢,至78h后几乎不再变化.药物敏感性试验表明,分离株对大环内酯类、氨基糖苷类和林可胺类等药物均存在不同程度的耐药,但对强力霉素和卡那霉素敏感或中度敏感.
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西藏黄花蒿内生真菌分离与鉴定
《动物医学进展 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为探讨西藏黄花蒿内生真菌种类与种群分布情况,对采集于西藏曲水的黄花蒿样品,用表面消毒法对样品消毒后进行内生真菌分离,获得36株内生真菌.通过形态学和rDNA-ITS序列分析技术对所得菌株进行种属鉴定,并通过MEGA软件进行系统进化分析.结果表明,西藏地区黄花蒿内生真菌丰富,从其根、茎、叶和花组织中共分离到36株内生真菌,总相对分离频率为91.67%.其中链格孢菌属(Alternaria sp.)在黄花蒿植株内分离频率最高,为优势菌属.拟壳多孢属(Stagonosporopsis sp.)存在于根、茎和叶中,分布最广.研究结果丰富了黄花蒿内生真菌种群多样性,并为产青蒿素内生真菌筛选奠定了基础.
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西藏那曲市牦牛源莫拉杆菌的分离鉴定与敏感药物筛选
《中国预防兽医学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了解西藏那曲牦牛莫拉杆菌的感染及耐药情况,本研究无菌采集具有体温升高、眼睛红肿、持续性流泪、眼角黄色脓液、失明等临床症状牦牛的28份鼻拭子和30份眼拭子样品,经细菌的分离纯化、革兰氏染色、生化试验鉴定结果初步表明,本研究从牦牛鼻拭子样品中里分离出了2株莫拉杆菌.并经16S rRNA的PCR扩增及其序列分析结果显示,该基因序列与GenBank登录的其它莫拉杆菌相应基因序列的同源性为97%~ 100%;该基因进化树结果显示,分离株与莫拉杆菌(DQ153089.1和NR 043583.2)聚为一支,进一步表明本研究分离的2株细菌均为莫拉杆菌,患病牦牛的红眼病是由该菌感染引起.药敏试验结果显示该菌对环丙沙星、氧氟沙星、红霉素、新霉素、丁胺卡那及诺氟沙星6种抗生素高度敏感,而对临床上常用的青霉素、卡那霉素、庆大霉素、复方新诺明和多西环素5种抗生素均耐药.本研究为那曲及其他牧区、半农半牧区的牦牛传染性角膜结膜炎的用药提供了参考依据.
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西藏日喀则地区绵羊源醋酸钙不动杆菌的分离鉴定及药敏试验
《黑龙江畜牧兽医(下半月) 》 2020 北大核心
摘要：为了解致西藏日喀则市某村死亡绵羊感染的主要病原,试验对采集的绵羊肝脏、肺脏、脾脏等病料组织进行病原菌的分离培养,对分离纯化后的细菌进行革兰氏染色;根据染色结果选择细菌鉴定卡和药敏鉴定卡进行鉴定,并对分离菌进行致病性分析;通过16S rRNA引物对分离菌进行PCR鉴定和遗传进化分析.结果 表明:分离菌为革兰氏阴性;对分离的1株优势菌进行全自动微生物鉴定系统VITEK2 Compact System的GN卡鉴定,结果为鲍曼不动杆菌复合物;分离菌对氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、庆大霉素、复方新诺明等8种药物敏感,对氨苄西林、头孢呋辛酯、安曲南、呋喃妥因等7种药物不敏感,对头孢曲松中度敏感;动物致病性试验结果表明,本菌具有一定的毒力;PCR产物测序比对后鉴定该菌为醋酸钙不动杆菌;遗传进化分析结果显示,该菌与序列号为MG011594.1的醋酸钙不动杆菌相似性达100%,确定为醋酸钙不动杆菌.说明西藏日喀则市某村死亡绵羊感染了醋酸钙不动杆菌,应加强防控.
关键词： 绵羊 醋酸钙不动杆菌 分离鉴定 药敏试验 PCR鉴定 遗传进化分析
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西藏绵羊溶血性曼氏杆菌分离鉴定及药敏特性研究
《中国草食动物科学 》 2019
摘要：为探究西藏自治区山南市某地农户饲养的绵羊大批死亡的原因,采集病死羊心脏、脾脏、小肠、肺脏、气管等病料,进行细菌培养、分离鉴定、PCR检测、血清型鉴定、毒力基因检测及药敏特性分析。结果显示:从病死羊肺脏病料中分离出一株溶血性曼氏杆菌,血清型为2型;特异性PCR检测为阳性,证明分离菌株为溶血性曼氏杆菌;药敏试验结果显示,分离的溶血性曼氏杆菌对大多数临床常用抗生素敏感;主要毒力基因lktA检测为阳性。该研究首次从西藏绵羊分离出溶血性曼氏杆菌,并研究了其药敏特性,为该病的诊断与治疗提供了参考。
关键词： 西藏 绵羊 溶血性曼氏杆菌 分离鉴定 血清型 药敏试验
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