科研产出
犬细小病毒VP2主要抗原表位基因的密码子优化及原核表达
《黑龙江畜牧兽医 》 2018 北大核心
摘要：为了制备大量廉价的可溶性犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验截选了VP2抗原表位集中的基因片段VP2-70进行密码子优化及合成,将合成基因克隆到pET-32a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-VP2-70,转化BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化,Western-blot检测验证其生物学活性。结果表明:试验构建的VP2-70表达载体能够介导VP2-70融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达量高出野生型VP2-70融合蛋白16 mg/L;Western-blot检测显示,该蛋白具有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。
关键词： 犬细小病毒 抗原表位基因 密码子优化 克隆 原核表达 融合蛋白
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青稞两个Rubisco相关酶基因的克隆和序列分析
《高原科学研究 》 2017
摘要：文章根据鉴定得到的青稞两个Rubisco相关酶00199和31184的序列设计了引物,从青稞叶片的cDNA中扩增得到目的片段,并对目的基因序列进行了测序鉴定和序列分析。结果表明,成功扩增出00199和31184两个基因的序列,大小分别为546bp和547bp。根据生物信息学分析得出结果:00199和31184为等位基因,序列相似性为90.98%,推测两者ORF全长均为546bp;00199编码的蛋白质含有181个氨基酸,相对分子质量为20.05KD,理论等电点(pI)为8.81,不含跨膜区和信号肽,存在典型的Rubisco结构域,是青稞光合作用中固定CO_2的重要酶之一。
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