科研产出
疥螨Sar s14.3过敏原蛋白原核表达及间接ELISA方法的建立
《中国人兽共患病学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：目的 预测疥螨猪变种转录组中过敏原蛋白，对Sar s 14.3过敏原蛋白进行生物特性分析、原核表达并建立间接ELISA诊断方法。方法 利用转录组测序（RNA-Seq）及BLAST、ProtParam、I-TASSER和COMPARE等软件和数据库对疥螨猪变种转录组中的过敏原组分进行预测并对疥螨Sar s 14.3过敏原蛋白序列进行理化性质分析、结构分析、同源性分析和间接ELISA诊断方法的建立。结果 在疥螨猪变种的18 980个转录本中共预测出390条过敏原序列，且随机匹配可能性值（E-value）为0的序列有28条。Sar s 14.3过敏原蛋白的理论相对分子质量为38 kDa,蛋白较稳定，为亲水性蛋白；二级结构以无规卷曲和β-折叠为主，其氨基酸序列与疥螨其他变种主要过敏原组分14蛋白序列相似性不低于99.76%,而与尘螨属螨虫的相似性最高为73.08%,与现行的形态学分类系统一致。所建立的间接ELISA诊断方法的最佳包被抗原浓度为2μg/mL,血清最佳稀释倍数是1∶400。结论 本试验成功预测了疥螨猪变种转录组中的过敏原序列并克隆、表达了疥螨猪变种Sar s 14.3蛋白，初步预测了其分子特征，并以该过敏原蛋白为基础成功建立了一种快速的间接ELISA检测方法，可用于疥螨病的初步诊断和流行病学调查。
关键词： 疥螨猪变种 转录组 生物信息学 Sar s 14.3过敏原 ELISA
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2020-2021年日喀则市羊痘的血清学调查分析
《现代畜牧兽医 》 2023
摘要：试验旨在研究西藏自治区日喀则市羊痘的免疫效果情况，于2020年10月和2021年4月在日喀则市5个县（区）的主要种羊场采集血清样本1 472份，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对样品进行羊痘抗体检测，使用R软件对检测结果进行统计学分析。结果显示，日喀则市羊痘总体阳性率为28.53%（420/1 472）。山羊阳性率为54.15%，绵羊阳性率为24.39%。2岁或2岁以下的阳性率为21.21%,3～6岁阳性率为33.09%,6岁或6岁以上的阳性率为28.14%。母羊阳性率为29.53%，公羊的阳性率为27.55%。研究表明，日喀则市羊痘免疫抗体阳性率为较低，感染风险较高。山羊的免疫效果优于绵羊，3～6岁的种羊免疫效果优于其他年龄的羊。
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靛玉红对ORFV感染淋巴细胞的增殖、细胞因子含量及CD分子表达量的影响
《黑龙江畜牧兽医 》 2023 北大核心
摘要：为了研究靛玉红对羊传染性脓疱病毒（Ovine contagious pustular dermatitis virus, ORFV）感染淋巴细胞的增殖、细胞因子质量浓度及CD分子表达量的影响，在靛玉红对ORFV感染淋巴细胞增殖的影响试验中，分为对照组、ORFV感染组、靛玉红（0.2μg/mL）+ORFV组、靛玉红（0.2μg/mL）组，采用CCK-8法检测靛玉红对ORFV感染淋巴细胞增殖的影响。另外，在靛玉红对ORFV感染细胞上清液中细胞因子质量浓度及CD分子表达量的影响试验中，分为高浓度靛玉红（0.2μg/mL）+ORFV组、中浓度靛玉红（0.1μg/mL）+ORFV组、低浓度靛玉红（0.05μg/mL）+ORFV组，于96孔培养板中，每孔加入淋巴细胞悬液100μL,之后加ORFV病毒悬液100μL,吸附2 h,弃病毒液，分别加入终浓度为0.2,0.1,0.05μg/mL的靛玉红溶液100μL,作用0,2,4,8,12 h,另设ORFV感染组（只加ORFV病毒悬液和RDMI-1640完全培养基）、对照组（只加RPMI-1640完全培养基）,采用ELISA方法检测细胞上清液中IFN-γ、TNF-β、IL-10的质量浓度及CD4、CD8的表达量，并计算CD4/CD8。结果表明：与ORFV感染组相比，靛玉红+ORFV组淋巴细胞增殖数极显著升高（P＜0.01）。与ORFV感染组比较，作用4,8,12 h后，高、中、低浓度靛玉红+ORFV组的CD4分子表达量和CD4/CD8显著或极显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,同时Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-β质量浓度及Th2型细胞因子IL-10的质量浓度不同程度升高，而CD8分子表达量降低。说明靛玉红能够增强ORFV感染淋巴细胞的增殖，促进IFN-γ、TNF-β和IL-10的分泌，提示靛玉红可能是通过调节CD4、CD8的表达来促进细胞因子的分泌，增加ORFV感染淋巴细胞的增殖，进而调节机体的免疫机能。
关键词： 羊传染性脓疱病毒 靛玉红 淋巴细胞 细胞因子 酶联免疫吸附试验 免疫调节
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2014-2019年青藏高原牦牛轮状病毒血清学检测与分析
《中国动物传染病学报 》 2021
摘要：为明确青藏高原4个省区牦牛轮状病毒（RV）的流行情况,本研究采用双抗原一步夹心ELISA法,对2014-2019年采集自西藏、青海、甘肃、四川的630份牦牛血清样品进行了RV抗体检测。结果显示:630份青藏高原牦牛RV血清抗体总阳性率为18.57%（117/630）,西藏地区牦牛RV抗体阳性率与其他地区相比较高;2014-2019年青藏高原地区牦牛RV血清抗体年阳性率分别为37.78%、7.62%、17.14%、14.17%、15.00%、13.33%,平均阳性率为18.57%;4省牦牛RV抗体阳性率分别为西藏（25.76%）、青海（8.33%）、甘肃（16.67%）、四川（11.67%）;4月龄以下牦牛（32.27%）极显著高于4～12月龄（14.05%）和大于12月龄（9.76%）。本研究结果为了解青藏高原地区牦牛轮状病毒病的血清流行病学情况奠定了坚实基础。
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西藏当雄县牦牛巴氏杆菌病血清流行病学调查
《中国动物检疫 》 2021
摘要：为了解西藏当雄县牦牛巴氏杆菌病流行现状,2019—2020年在牦牛养殖较为集中的5个乡镇,采集存栏2 000头以上的2个养殖场以及存栏30头以上的56个牧户未免疫牦牛血清1 124份,通过酶联免疫吸附试验（ELISA）进行牛巴氏杆菌血清抗体检测,并使用R软件对不同年龄、性别、饲养方式牦牛的检测结果进行统计分析。结果显示:当雄县牦牛巴氏杆菌个体阳性率为11.57%（130/1124）,群体阳性率为89.66%（52/58）;养殖场牦牛个体阳性率（12.96%）与牧户（10.92%）无统计学差异（P> 0.05）;公牦牛个体阳性率（10.07%）与母牦牛（12.45%）无统计学差异（P> 0.05）;3岁以下牦牛个体阳性率（5.08%）与6岁以上牦牛（22.81%）有统计学差异（P <0.01,OR=5.52）。结果表明,巴氏杆菌病在该县牦牛群中流行普遍,无养殖模式和性别差异,但老龄牦牛感染率较高。结果提示,当雄县需要加强牦牛饲养管理和巴氏杆菌疫苗免疫,及时淘汰老龄牦牛。
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林芝市两区县藏猪流行性腹泻血清学调查
《湖北畜牧兽医 》 2019
摘要：为了解西藏市猪流行性腹泻(PED)流行病学情况,采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)对采集的林芝市巴宜区和米林县364份藏猪血清进行检测.结果表明:藏猪的PEDV抗体平均阳性率为39.56%,其中公猪血清抗体阳性率为40.63%,母猪血清抗体阳性率为38.37%.从性别上公猪和母猪的抗体阳性率无显著性差异(P>0.05),但巴宜区(26.37%)和米林县(52.74%)PEDV抗体阳性率存在显著性差异(P<0.05).说明林芝部分地区藏猪流行性腹泻感染普遍,应注意防止该病的发生.
关键词： 藏猪 猪流行性腹泻(PED) ELISA
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应用ELISA法进行西藏牦牛牛支原体流行病学研究
《高原农业 》 2018
摘要：为了摸清近年来西藏各地区牦牛支原体感染情况。应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自西藏全区的2126份牦牛血清进行牛支原体抗体检测。结果检出阳性血清994份,其阳性率为46.75%。从西藏七地的具体情况来看,其阳性率分别为:林芝57.14%(40/70)、昌都46.73%(229/490)、拉萨53.24%(41/77)、山南16.67%(4/24)、日喀则47.81%(491/1027)、阿里55.21%(143/259)、那曲25.70%(46/179)。结果表明西藏各地牦牛支原体感染均比较严重,且大部分地区感染率呈现上升趋势,应及时采取必要措施进行综合防控。
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墨竹工卡和工布江达两县的川藏公路沿线藏猪流感病毒的血清学调查
《养猪 》 2016
摘要：鉴于墨竹工卡和工布江达两县的川藏公路沿线是藏猪养殖较为密集区,为了解该地区藏猪流感病毒(SIV)的流行情况,采用抗体ELISA(酶联免疫吸附试验)和血凝抑制试验(HI)同时对墨竹工卡和工布江达两县的川藏公路沿线工卡镇、扎西岗乡、日多乡、加兴乡和金达镇5个乡镇藏猪的600份血清进行H1N1 SIV和H3N2 SIV抗体检测。结果显示,H1N1 SIV抗体检测分析,阳性血清共248份(41.33%);H3N2 SIV抗体检测分析,阳性血清共90份(15.00%);H1N1 SIV和H3N2SIV混合感染抗体检测分析,阳性血清共59份(9.83%)。断奶仔藏猪和1岁以上藏猪的感染率均以海拔相对较低的加兴乡和金达镇为高。研究为墨竹工卡和工布江达两县的川藏公路沿线藏猪H1N1 SIV和H3N2 SIV的预防提供参考依据。
关键词： 藏猪 流感病毒 血清学调查 ELISA 血凝抑制试验
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西藏部分地区牦牛副结核病血清流行病学调查
《中国奶牛 》 2015
摘要：为调查副结核病在西藏地区牦牛群感染及流行情况,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),对2012~2014年采自西藏部分地区的468份牦牛血清进行副结核分枝杆菌抗体检测。结果检出9份阳性血清,2份可疑血清,总体阳性率为1.92%(9/468);2012~2014年阳性率分别为1.27%(2/157)、2.42%(4/165)和2.05%(3/146)。结果表明,西藏地区牦牛存在副结核分枝杆菌的感染,在牛群中呈较低的流行率。该调查结果可为当地的牦牛产业疾病防控提供依据。
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中国西部高原地区牦牛传染性鼻气管炎血清学检测报告
《中国奶牛 》 2014
摘要：应用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对在2011年间采自西藏(988份)、青海(475份)和四川(377份)共1840份牦牛血清样品进行牛传染性鼻气管炎病毒抗体检测。结果检出阳性血清样品西藏381份,阳性率38.6%;青海212份,阳性率为44.6%;四川105份,阳性率为27.9%。结果表明,中国西部高原西藏、青海以及四川牦牛群中均存在牛传染性鼻气管炎病毒的感染。本研究调查了牛传染性鼻气管炎在中国西部高原牦牛群中的流行情况,为制定该病的防治措施提供理论依据。
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