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青稞核糖体蛋白基因HbRPL19的克隆、序列分析及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 徐齐君 1 ; 扎桑 1 ; 王玉林 1 ; 原红军 1 ; 曾兴权 1 ; 尼玛扎西 1 ;

作者机构： 1.西藏自治区农牧科学院农业研究所;省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室;西藏自治区农牧科学院

关键词： 青稞;核糖体蛋白;RPL19;序列分析;原核表达

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2018 年 06 期

页码： 1111-1115

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】克隆青稞核糖体蛋白基因HbRPL19,分析其序列特征并在大肠杆菌中诱导目的蛋白,为后续的研究奠定基础。【方法】根据鉴定得到的青稞HbRPL19的序列设计了引物,从青稞叶片的c DNA中扩增得到目的片段,并对目的基因序列进行了测序鉴定和序列分析,同时构建了原核表达载体p ET28a-RPL19,转化入大肠杆菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测。【结果】成功扩增出了青稞核糖体蛋白基因HbRPL19的CDS全长序列,大小为654 bp。根据生物信息学分析的结果,HbRPL19编码的蛋白质含有217个氨基酸,相对分子质量为24.47 KD,理论等电点(p I)为10.42,总平均亲水性(GRAVY)为-0.353,不稳定系数为53.46,存在典型的SH3-like结构域和核糖体蛋白L19结构域。系统进化分析表明,HbRPL19与小麦和山羊草的RPL19具有较近的亲缘关系。蛋白表达结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。【结论】获得了青稞抗寒相关基因HbRPL19的序列和蛋白。

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