文献类型： 中文期刊

作者： 孙滔 ¹ ; 米荣升 ² ; 张烨华 ² ; 张世杰 ¹ ; 张晓丽 ² ; 贾海燕 ² ; 曾江勇 ³ ; 黄燕 ² ; 龚海燕 ² ; 韩先干 ² ; 陈兆国 ² ; 赵权 ¹ ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物科学技术学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所

关键词： 18S rRNA基因;28S rRNA基因;cox1基因;PCR方法;住肉孢子虫

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2020 年 41 卷 012 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为筛选敏感、特异的住肉孢子虫(Sarcocystis spp.)PCR检测方法,对以住肉孢子虫18S rRNA、28S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶I基因(cox 1)的部分片段为靶基因设计的3套引物建立的PCR方法进行敏感性和特异性试验,并对田间采集的100份牛源和猪源肌肉样品进行检测.结果显示,以18S rRNA和28S rRNA为靶基因的PCR检测方法的敏感性相似,DNA最小检出量均为1×10-2 ng/μL;而以cox 1为靶基因的PCR检测方法敏感性相对较低,DNA的最低检出量为1 ng/μL.对7种不同寄生虫DNA进行特异性试验,结果以cox 1基因为靶基因的PCR方法特异性较好,仅能够扩增出枯氏住肉孢子虫(Sarcocystis cruzi)DNA;以18S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫和微小隐孢子虫也有相似扩增条带;以28S rRNA为靶基因的PCR法,除枯氏住肉孢子虫外,刚地弓形虫、微小隐孢子虫和欧猥迭宫绦虫DNA也能扩增出杂带,但大小不符.利用3种方法对100份牦牛和猪肉样品进行扩增,发现以18S rRNA、28S rRNA和cox 1为靶基因的PCR法的阳性率分别为36.00%(36/100)、43.00%(43/100)和38.00%(38/100).结果表明,以cox 1为靶基因的PCR法有良好的特异性,适合用于田间动物肌肉样品中住肉孢子虫的检测,为开展动物住肉孢子虫病分子流行病学及防控研究提供了依据.