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青稞类钙调素蛋白基因CML19的克隆、序列分析及原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 韦泽秀 1 ; 原红军 1 ; 扎桑 1 ; 王玉林 1 ; 徐齐君 1 ; 曾兴权 1 ; 尼玛扎西 1 ;

作者机构： 1.西藏自治区农牧科学院农业资源与环境研究所;省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室;西藏自治区农牧科学院农业研究所;西藏自治区农牧科学院

关键词： 青稞;类钙调素蛋白;CML19;序列分析;原核表达

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2018 年 07 期

页码： 963-969

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鉴定得到青稞类钙调素蛋白基因CML19的序列设计引物,以青稞叶片的cDNA为模板,扩增得到目的片段,对目的基因序列进行鉴定和分析,进一步构建该基因的原核表达载体pET28a-CML19,转入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测。结果表明,扩增得到CML19的CDS序列全长为447bp,编码的蛋白质含有148个氨基酸,分子质量为16.46ku,理论等电点(pI)为4.40,总平均亲水性(GRAVY)为-0.176,不稳定系数为49.59,存在典型的EF手结构域;系统进化分析表明,青稞CML19与山羊草具有较近的亲缘关系;原核表达蛋白结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。初步阐明青稞CML19基因的序列特征,为进一步制备抗体、探讨CML19基因的功能奠定基础。

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