文献类型： 中文期刊

作者： 曾兴权 ¹ ; 尼玛扎西 ² ; 于静娟 ² ; 唐亚伟 ² ; 韦泽秀 ² ; 其美旺姆 ² ; 达瓦顿珠 ² ; 刘仁建 ² ; 雄奴塔巴 ² ; 扎西罗布 ² ; 高丽云 ² ;

作者机构： 1.西藏自治区青稞种质改良和牦牛繁育重点实验室

2.西藏自治区青稞种质改良和牦牛繁育重点实验室;西藏自治区农牧科学院;中国农业大学农业生物技术重点实验室

关键词： 青稞;干旱胁迫;SSH;EST

期刊名称： 麦类作物学报

ISSN： 1009-1041

年卷期： 2012 年 32 卷 04 期

页码： 50-57

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究西藏青稞抗旱的分子机制,以西藏耐旱青稞(Hordeum vulgare L.var.nudum HK.f.)品种喜玛拉雅10号为材料,利用抑制性差减杂交技术(SSH)构建青稞苗期叶片干旱胁迫诱导基因表达的正向差减文库。挑取600个阳性克隆进行PCR验证,并对验证后的单克隆进行测序分析,共获得420个有效序列。去除冗余序列和嵌合序列后,获得220条高质量EST序列,其中183条singlets,37条contigs。BlastN分析表明,其中189个EST序列可以在GenBank的unigene中找到同源序列,31个未能找到unigene同源序列;BlastX分析表明,62个EST序列unigene与未知功能蛋白或假定蛋白有较高的相似性;158条EST序列与已知功能蛋白有较高的同源性。获得的EST序列多数不仅与植物的非生物胁迫相关,也与植物的生物胁迫反应相关,说明植物在胁迫反应中有明显的共同机制。其中与大麦表达序列高度同源的EST占58%;这些基因涉及参与信号转导和转录调节的基因(11.96%),编码保护、防御和胁迫耐受蛋白的基因(9.78%),跨膜转运相关基因(5.43%),光合作用基因(6.52%),参与结构和功能代谢合成途径中的一些酶(30.43%)等代谢过程。实验结果表明,青稞在干旱复水条件下可诱导一系列特异基因的表达,如参与抗旱反应相关酶和蛋白基因锌指蛋白、衰老相关蛋白、CAS、细胞色素P450、热激蛋白、胁迫诱导蛋白,以及LEA蛋白、脱水蛋白、P5CS等保护蛋白基因。用KOBAS系统将56个EST定位到32个Pathways中,初步分析发现,谷氨酸盐代谢途径(Glutamate metabolism)、精氨酸和脯氨酸代谢途径(Arginine and proline metabolism)、泛素蛋白介导的蛋白质水解代谢(Ubiquitin mediated proteolysis)途径可能与青稞抗旱相关性较大。