科研产出
非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立
《动物医学进展 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：非洲猪瘟给全球养猪业造成了严重危害,需要建立更加敏感的PCR检测方法。根据非洲猪瘟病毒（ASFV）的VP72基因序列,设计PCR引物,建立了ASFV PCR检测方法。以合成的VP72基因片段为阳性对照,进行敏感性试验和特异性试验。同时与世界动物卫生组织（OIE）推荐的PCR引物进行对比试验。结果显示,建立的方法可用于ASFV检测,且对其他病毒检测时无交叉反应,特异性良好;敏感性可达到10-8,比OIE推荐的方法高10倍,为ASFV检测提供了一种新的PCR方法。
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西藏绒山羊传染性脓疱的诊断与重要器官的病理学观察
《中国兽医科学 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：本研究对尼玛县某羊场白绒山羊疑似患传染性脓疱进行了RT-PCR检测,并对6例病山羊进行病理剖检和病理组织学观察,以探讨其病理变化特点。PCR检测结果表明,6份样品中均扩增出579 bp的目的基因片段;对其测序分析结果表明,该序列与羊传染性脓疱病毒(CEV)基因序列同源性较高。病理剖检显示,6例病山羊程度不等口唇部、面部肿胀,口腔、舌头黏膜面有大小不等丘疹、溃疡和脓疱;瘤胃与网胃黏膜也有丘疹或结节状突起,甚至密布瘤胃黏膜表面;心脏上有大小不等坏死病灶。病理组织学检查显示,病变口腔黏膜与瘤胃黏膜上皮细胞大量增生,增生的黏膜上皮又程度不等水泡变性、气球样变,变性上皮细胞内可见嗜酸性胞浆包涵体;黏膜固有层充血、水肿,有大量单核细胞、中性粒细胞浸润,甚至形成大小不等的微脓肿;心脏均呈程度不等的变质性心肌炎或化脓性心肌炎;肺脏呈程度不等的间质性肺炎;肝、脾有程度不等的淤血、变性;全身淋巴结呈急性浆液性淋巴结炎;研究证明,除口腔、舌头外,瘤胃黏膜的病变和心脏的变质性炎症也是羊传染性脓疱病具有代表性的变化之一。以上结果证实,6只白绒山羊所患的疫病是羊传染性脓疱(羊口疮)。
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西藏青稞抗旱相关基因表达模式分析研究
《现代农业科技 》 2015
摘要：从青稞苗期叶片干旱胁迫诱导基因表达的正向差减文库中筛选出丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因(AAPK)、胁迫诱导蛋白基因(Tsi1)、脱水蛋白基因(Dehydrin)、Δ1-二氢吡咯-5-羧酸合成酶基因(P5Cs)等9个与抗旱相关的基因,采用实时荧光定量PCR对其表达模式进行分析。结果表明,在渍水条件下,Tsi1、ERA1、Os SKIPa、Nt-SYR1、SHMT和AAPK基因上调表达,而P5Cs、Dehydrin基因下调表达;随着干旱胁迫处理时,Tsi1、ERA1、Os SKIPa和AAPK基因也呈上调表达,干旱复水后8 h时,这些基因表达量均达到最高。Nt-SYR1干旱胁迫后,在土壤绝对含水量达到4.8%明显上调表达,复水后2 h时表达量最高;P5CSs基因,在严重干旱胁迫下呈下调表达,在干旱后复水后表达量逐步上调表达;Dehydrin基因在干旱胁迫处理时上调表达,随着复水时间增加,也呈上调表达;SHMT基因在干旱处理里及复水后均而呈下调表达;SAMDC基因在渍水及正常生长所需的土壤绝对含水量时表达无变化,干旱处理时呈下调表达,但土壤绝对含水量达到4.8%明显上调表达,之后又呈下调表达,整个处理时期表达量较低。
关键词： 青稞 干旱胁迫 基因 Real Time PCR 西藏地区
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TLR2、4/MyD88通路相关分子mRNA在急性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义
《饲料博览 》 2012
摘要：试验旨在研究TLR2、4/MyD88通路相关分子mRNA在炎症过程中的作用机制及相互关系。诱导急性结肠炎小鼠模型,分别于造模前、造模后1、3、5、7 d各处死6只小鼠,并采用实时荧光定量RT-PCR检测结肠组织中TLR2、TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α和IL-10 mRNA的表达量变化。结果表明,与造模前比较,TLR2mRNA在造模后3、5 d的表达量显著增加(P<0.05),造模后7 d时的表达具有极显著差异(P<0.001);TLR4在造模后1 d就显著上调(P<0.05),在造模后3、5、7 d更是异常高表达(P<0.001);MyD88和NF-κB mRNA的表达量都在造模后5、7 d迅速增加(P<0.01);TNF-α在造模后各阶段(除造模后1 d外)均出现高表达(P<0.01或P<0.001);IL-10在造模后1 d的转录水平急剧上升(P<0.001),此后则逐渐回落,但其表达水平高于造模前。TLR2/4可能通过正调节MyD88、NF-κB和TNF-α,负调节IL-10等关键节点分子的mRNA表达水平来参与炎症反应。
关键词： 小鼠 急性结肠炎 TLRs/MyD88通路 mRNA表达量 荧光定量RT-PCR
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西藏那曲地区旋毛虫分离株的分子分类鉴定
《中国兽医科学 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：从西藏那曲地区旋毛虫抗体阳性藏猪获取膈肌组织,显微镜检查后采用人工消化法收集旋毛虫肌幼虫。提取旋毛虫基因组,以旋毛虫(T.spiralis)和乡土旋毛虫(T.nativa)标准株为对照,应用线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA特异引物进行PCR扩增,结果扩增产物为650bp,与T.spiralis一致。对西藏那曲旋毛虫分离株的5SRNA内转录间隔区基因进行PCR扩增及序列测定,与GenBank数据库中已知的旋毛虫序列进行比对分析,确定其分类地位。结果扩增到735bp的片段,与T.spiralis的相似性达到99%,仅有3个核苷酸不同,可以归为一类。结果表明,西藏那曲旋毛虫分离株应该属于T.spiralis。
关键词： 西藏那曲旋毛虫分离株 聚合酶链反应 分子鉴定
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