科研产出
1株牦牛源停乳链球菌全基因组测序及生物学特性分析
《中国兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：对西藏那曲市牦牛乳汁样本进行细菌分离鉴定、药敏试验、毒力基因检测及致病性试验，以评估分离菌株的生物学特性，同时通过全基因组学测序进行毒力因子和耐药基因等分子生物学信息分析，并通过PCR对毒力基因进行验证。结果显示，从牦牛乳汁中分离出1株停乳链球菌，其菌落形态为针尖大小、边缘光滑、呈乳白色。该菌株对多种抗生素(青霉素G、头孢类、环丙沙星、四环素、红霉素等)敏感。毒力基因检测结果显示，该菌株携带了6种关键毒力基因(cyl、eno、scpB、bca、bac和napr),这些基因可能与其致病性密切相关。致病性试验中，小鼠在感染后精神萎靡、活动减少，但在观察期内未发生死亡。剖检发现脾脏、肾脏、肝脏肿大及肺组织病理变化，提示该菌株具有一定的致病潜能但非高致死性。全基因组测序数据显示，该菌株基因组长为4 079 280 bp, GC含量为39.41%,3 964个编码基因被预测，其中604个被注释为毒力因子，另有28个基因突变可能增强了其病原致病能力。通过CARD数据库注释，发现存在2个PatA抗性基因和2个lmrp抗性基因，揭示了其潜在的耐药机制。本研究通过全基因组测序技术结合生物信息学分析方法，揭示了牦牛源停乳链球菌的基因组特征及其耐药性和致病性机制，为深入探索牦牛源停乳链球菌的致病机理、耐药机制以及分子进化规律提供重要的科学依据。
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牦牛源表皮葡萄球菌的分离鉴定和生物学特性研究
《中国兽医杂志 》 2024 北大核心
摘要：为了解西藏拉萨地区牦牛源表皮葡萄球菌的携带情况，本试验随机采集了26份拉萨地区牦牛鼻拭子样品，采用细菌分离纯化和形态学鉴定、生化鉴定以及16S rDNA测序和同源性比对分析对分离菌株进行鉴定；选取19种常用抗生素，利用K-B药敏纸片扩散法对分离菌株进行药敏试验；检测四环素类耐药基因tet(M)和tet(K),林可胺类、氯霉素类、截短侧耳素类、恶唑烷酮类、链阳霉素A类多药耐药基因cfr,β-内酰胺类耐药基因mecA和酰胺醇类耐药基因fexA五种耐药基因，研究分离菌株的耐药性；进行攻毒试验，检测分离菌株的致病性。结果显示，分离得到1株表皮葡萄球菌，命名为LZ-1;LZ-1对氨苄西林、青霉素和红霉素耐药，对多黏菌素B、头孢他啶和克林霉素中介，对头孢曲松、四环素和新霉素等13种抗生素敏感；共检测出tet(M)、tet(K)和mecA三种耐药基因；该菌株对小鼠致病性不强。结果表明，本试验分离出1株牦牛源表皮葡萄球菌，有一定的耐药性，可为其防治提供一定的参考。
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1株牦牛源A∶L3型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及致病性分析
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探究西藏阿里地区某养殖场内牦牛发病和死亡病因,分析其病原菌生物学特性,为有效防治该病提供参考.[方法]无菌采集死亡牦牛病变组织,根据临床症状进行实验室诊断并分离培养病原菌.通过形态学观察、生化鉴定、16S rRNA PCR扩增并测序、kmt基因鉴定、荚膜血清分型、脂多糖分型对分离株进行鉴定,并探究分离株的药物敏感性和致病性.[结果]分离株在7%血清TSA培养基中长出灰白色、透明、露滴样菌落;革兰染色镜检可见两端浓染的革兰阴性短杆菌.生化鉴定结果显示,分离株在葡萄糖、鸟氨酸脱羧酶、氧化酶、山梨醇和甘露醇生化反应管中呈阳性.荚膜血清分型及脂多糖分型结果显示,分离株为多杀性巴氏杆菌荚膜血清A型脂多糖L3型.药敏试验结果显示,分离株对羧苄西林、氨苄西林、头孢唑林、庆大霉素、呋喃妥因、头孢呋辛、丁胺卡那、米诺环素和诺氟沙星均表现敏感.致病性试验结果显示,小鼠腹腔注射0.2 mL 1×108 CFU/mL分离株菌液后,死亡率为100%(5/5),分离株具有较强致病性.[结论]本研究成功分离鉴定出1株血清A型脂多糖L3型多杀性巴氏杆菌,其对羧苄西林、氨苄西林、头孢唑林等药物敏感,致病性较强.研究结果为探究牦牛源多杀性巴氏杆菌的生物学信息和病原学特征提供了数据参考.
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1株牦牛源A型产气荚膜梭菌的生长特性及致病性研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2023 北大核心
摘要：为了了解青海牦牛源产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens,Cp）的生长特性及致病性，并计算其对感染小鼠的半数致死量(LD50),以及观察感染小鼠各器官组织的损伤情况，试验复苏牦牛源产气荚膜梭菌ZD-01（CpA ZD-01）并配制种子液，采用振荡比浊法绘制CpA ZD-01菌株的生长曲线，并研究对数期菌液的OD600值与稀释倍数和细菌数量的关系；测定其外毒素粗提取液OD280值和OD260值，计算出不同培养时间毒素蛋白含量；给小鼠腹腔注射菌液，根据小鼠死亡情况确定LD0和LD100,并计算LD50,解剖小鼠观察牦牛源CpA ZD-01菌株对各组织器官的影响。结果表明：按照5%接种量接种菌株后，＞2～10 h为对数期；菌液OD600值（y）与稀释倍数（x）的关系式为y=-0.607lnx+1.551,R~2=0.990,P＜0.05;菌液OD600值（y）与细菌数量（z）的关系式为y=4.679z-4.448,R~2=0.995,P＜0.05;在培养12 h后菌株所产生的毒素蛋白含量达到3.480 mg/mL,且第12小时为最佳产毒时间；菌株对感染小鼠的LD50为5.955×10~8 cfu/mL。急性死亡小鼠各器官无明显病理变化；慢性死亡小鼠脾脏白髓可见细胞增生，红髓淤血；大脑组织间质血管充血；肝细胞空泡变性；肾小管变性并伴有透明管型；肠道组织出现自溶现象。说明牦牛源CpA ZD-01菌株致病性较强。
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