科研产出
牦牛源A型产气荚膜梭菌的分离鉴定及生物学特性研究
《中国畜牧兽医 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]2023年4月至2023年5月,西藏拉萨市多地出现牦牛严重腹泻、便血甚至死亡的现象.试验旨在确定牦牛腹泻的病原菌并研究其生物学特性,以期为该地区牦牛腹泻病的防治提供参考.[方法]采集新鲜牦牛腹泻粪便样品进行厌氧培养,通过培养特性及染色镜检进行初步鉴定;对可疑阳性菌株进行生化特性、多重PCR毒素基因分型及cpe、netB、cpb2毒素鉴定,并进行cpa、cpb2、16S rRNA基因的遗传进化分析、部分分离株生长曲线测定及动物致病性试验;采用K-B法测定分离株的体外药物敏感性,统计不同分离株的多重耐药结果.[结果]从样品中分离纯化得到8株分离菌,在厌氧培养基中生长旺盛,在TSC培养基、5%脱纤维绵羊血平板、卵黄琼脂培养基上均呈现与产气荚膜梭菌相似的典型菌落,革兰染色为紫色大杆菌,初步判定为产气荚膜梭菌,命名为XZ-1~XZ-8.分离株生化检测结果与产气荚膜梭菌相符;分离株均携带cpa和cpb2基因,为A型产气荚膜梭菌;16S rRNA基因分析结果显示,8株分离株与产气荚膜梭菌参考株的相似性为97.3%~100%,在系统进化树中处于同一分支,而与屎肠球菌、大肠杆菌参考株处于不同分支;分离株cpa和cpb2基因存在一定的变异性.生长曲线显示,3株分离株(XZ-1、XZ-4、XZ-7)生长规律基本一致,其中0~4 h为迟缓期,4~8 h为对数期,8~22 h为稳定期,22 h后开始进入衰亡期.动物致病性试验结果显示,分离株对昆明小鼠具有较强的致病性.分离株对苯唑西林、红霉素、氯霉素、氧氟沙星、米诺环素、头孢哌酮、利福平及罗红霉素敏感,对青霉素、哌拉西林、羧苄西林、麦迪霉素、头孢曲松等22种药物均存在不同程度的耐药性,存在多重耐药性,其中XZ-7株耐药数量多达11种,6重以上耐药的菌株占75.0%.[结论]本研究成功从拉萨严重腹泻、血便牦牛粪样中分离出8株A型产气荚膜梭菌,分离株对小鼠具有较强的致病性,对青霉素、哌拉西林、羧苄西林等药物存在不同程度的耐药性.研究结果为该地区牦牛腹泻病防控提供了参考依据.
关键词： 牦牛 产气荚膜梭菌 分离鉴定 生长曲线 动物致病性 耐药性
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放牧条件下河谷型藏绵羊早期生长发育规律分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2022 北大核心
摘要：为了研究河谷型藏绵羊早期生长发育规律，试验应用Logistic、Gompertz、Von Bertalanffy三种模型对放牧条件下0～18月龄的50只公羔和50只母羔的体重及体尺指标早期发育情况进行拟合及分析。结果表明：河谷型藏绵羊公羔和母羔的体重和体尺指标发育具有阶段性，公羔体重、体长、体高、管围生长速度比母羔快。0～3,7,18月龄公羔体重与体尺指标呈极显著正相关（P<0.01）,其中0～3月龄公羔胸围与体重的相关系数最大；除0月龄母羔管围与体重的相关性不显著（P>0.05）、体长与体重呈显著正相关（P<0.05）外，其他月龄体重和体尺指标均呈极显著正相关（P<0.01）。Gompertz、Logistic、Von Bertalanffy 3种模型均能很好拟合河谷型藏绵羊0～18月龄体重和体尺的生长发育过程，从拟合度来看，Gompertz模型对体重拟合效果最优，Von Bertalanffy模型对体尺拟合效果最优。公羔的极限体重为28.90 kg,拐点体重为10.63 kg,拐点月龄为2.99月龄，最大月增重为3.31 kg;母羔的极限体重为26.91 kg,拐点体重为9.90 kg,拐点月龄为3.36月龄，最大月增重为2.44 kg。说明0～3月龄是河谷型藏绵羊早期生长发育的关键时期，应加强母羊和羔羊各方面的营养需求，发挥羔羊最大生长优势，缩短生长周期。
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西藏牦牛牛支原体的分离鉴定及其生长特性、耐药性分析
《中国农业大学学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为确定引起西藏牦牛常发多发肺炎的细菌病原体,采集145份西藏牦牛鼻腔粘液,通过病原分离培养、菌落形态观察、生化试验和PCR鉴定等方法进行细菌检测;通过OD630和pH变化对分离株进行生长曲线测定;采用K-B纸片法进行药物敏感性试验.结果显示:从145份牦牛鼻腔粘液中分离得到10株牛支原体;分离株菌落形态和生化试验结果均符合牛支原体的生物学特性;通过PCR分别扩增得到238bp的uvrC特异性基因与1 500bp16SrRNA基因.10株分离株间的uvrC特异性基因和16SrRNA基因序列同源性较高,均与国际标准株PG45有高度同源性,uvrC特异性基因序列和16SrRNA基因序列与国际标准株PG45的同源性分别为98.4%~100%和99.1%~99.9%.生长曲线测定表明,分离株在PPLO培养基中培养24h内为迟缓期,培养42h后开始进入稳定期,78h后开始进入衰亡期;3个分离株培养物的平均pH随着培养时间延长不断降低,其中24~42h期间pH下降最快,随后下降速度减慢,至78h后几乎不再变化.药物敏感性试验表明,分离株对大环内酯类、氨基糖苷类和林可胺类等药物均存在不同程度的耐药,但对强力霉素和卡那霉素敏感或中度敏感.
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高活性双歧杆菌菌粉的研制
《西藏农业科技 》 2005
摘要：双歧杆菌为益生菌,它对人体的保健作用日益被人们所重视和利用,本文采用脱脂牛奶为培养基,通过对生长曲线,生长期内的PH值变化以及4℃7500r/min离心5min所得湿菌体重的变化值的测定。初步掌握了该菌的生长,繁殖和代谢规律,从而为制作双歧杆菌发酵剂的最佳时间提供了理论依据。然后进行湿菌体的冷冻干燥实验,制作出活菌粉,并研究了4种保护剂对双歧杆菌冷冻干燥过程中存活率的影响。结果表明:①采用10%接种量,37℃恒温厌氧培养31-43小时活茵最多,适宜冻干;②4种冷冻保护剂的最优组合是2%甘油、6%蔗糖、1.0%明胶、0.4%L-半胱氨酸,其中以甘油对保护效果的影响最为显著;③用试验所得的最佳工艺方法,研制出冻干菌粉的存活率达87.1%。
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