产苦马豆素疯草内生真菌U.oxytropis的发酵培养及苦马豆素检测方法的建立

宋向东; 郝宝成; 梁剑平; 续文君; 王保海; 刘建枝; 夏晨阳; 邢小勇; 包世俊; 胡永浩; 《中国兽医学报 》 2019

摘要：通过对生长初期疯草内生真菌U.oxytropis菌丝复苏后连续培养32d,每隔4d取样1次,并设3个平行培养组,测定其不同培养时期菌丝干重变化,利用超声减压旋蒸法提取菌丝和发酵液中苦马豆素(SW),并分别利用薄层层析法、气相色谱法和α-甘露糖苷酶抑制法对菌丝、发酵液中SW含量进行测定.结果显示,经测定疯草内生真菌U.oxytropis菌丝干重质量,确定疯草内生真菌U.oxytropis生长周期为24d;薄层层析法、气相色谱法和α-甘露糖苷酶抑制法都可快速对菌丝和发酵液中提取的SW进行定性、定量检测,并比较3种检测方法,发现气相色谱法检测限低、灵敏度更高.本试验完成了疯草内生真菌U.oxytropis生长周期的测定,并建立了菌丝、发酵液中SW的有效、快速提取及检测方法,为下一步产苦马豆素疯草内生真菌U.oxytropis生物合成机理的研究奠定基础.

关键词： 疯草内生真菌U.oxytropis 苦马豆素 生长周期 α-甘露糖苷酶抑制法