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资源类型: 中文期刊
关键词:几丁质酶(模糊匹配)
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白菜型冬油菜BraCTL1基因表达模式及其启动子活性分析

2025

摘要:为探究白菜型冬油菜(Brassica rapaL.)几丁质酶chitinase-like, CTL)基因与抗寒性的关系,本研究以强抗寒品种陇油7号和弱抗寒品种天油4号的白菜型冬油菜为材料,分离克隆了BraCTL1基因启动子序列,构建BraCTL1基因启动子融合GUS基因载体,进行烟草遗传转化,结合PLACA在线软件,分析了BraCTL1启动子顺式调控元件及BraCTL1基因的表达模式。结果表明,低温处理后陇油7号叶片变为墨绿色、叶柄有明显弯曲,而天油4号叶片完全皱缩、边缘有明显的黄化、叶柄完全失去支撑、出现明显冻害形态。低温胁迫后陇油7号幼苗叶片中BraCTL1基因表达显著上升,在-8℃达到峰值,天油4号在-4℃达到最高值;-4℃处理2 h后陇油7号与天油4号叶片中BraCTL1基因表达量显著升高,陇油7号在18 h达最高值,天油4号在24 h达最高值;BraCTL1基因在叶柄中的表达量最高,叶片次之,根中显著低于叶柄和叶片。启动子结构分析表明,BraCTL1启动子区域含有7种不同类型的顺式作用元件,主要包含启动子核心序列,冷胁迫响应元件、光响应元件,激素响应元件、干旱响应元件、厌氧有关元件以及参与MeJA反应相关元件。BraCTL1启动子片段GUS染色结果表明,全长(2000 bp)、W1(1684 bp)、W2(1000 bp)和W3(575 bp)缺失片段均可以正常表达,而-1684 bp~-575 bp位点的5 '端片段具有较高的转录活性。

关键词: 白菜型冬油菜 几丁质酶 启动子 BraCTL1 基因表达

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BrCTL1基因增强白菜型冬油菜抗寒性

干旱地区农业研究 2025 北大核心 CSCD

摘要:通过显微镜观察强抗寒冬油菜叶片几丁质酶蛋白冰晶形态,分析其编码基因家族冷胁迫下的表达模式.克隆几丁质酶基因(BrCTL1),进行亚细胞定位与过表达载体构建,测定过表达株系低温胁迫下生理变化及基因低温表达模式.结果表明,在冷胁迫环境下,从强抗寒白菜型冬油菜叶片中提取的蛋白液,具备显著的重结晶抑制活性,有效抑制冰晶生长,同时含有高活性的抗冻蛋白.SDS-PAGE电泳将该蛋白鉴定为几丁质酶(chitinase,CTL1).同源克隆油菜BrCTL1(Brapa08T003472.1)基因,其ORF全长963 bp,编码321个氨基酸,BrCTL1蛋白被定位在叶绿体上.低温胁迫下,BrCTL1基因过表达植株形态无明显变化,突变体与野生型植株出现明显冻害症状,过表达拟南芥株系SOD、POD、CAT活性较野生型分别提高20%、17%、48%,CTL1突变体则分别降低65%、32%、67%.低温胁迫下,BrCTL1过表达株系相对电导率和MDA含量较野生型分别降低19%和45%,CTL1突变体分别提高9.4%和5.7%.综上,BrCTL1基因能够显著增强转基因拟南芥植株的抗寒性.

关键词: BrCTL1基因 白菜型冬油菜 抗冻蛋白 几丁质酶 低温胁迫 抗寒性

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