1株羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及耐药性分析

刘泽武; 樊月圆; 袁嘉芮; 格桑卓嘎; 班旦; 白卫兵; 茶金龙; 四朗玉珍; 富国文; 《中国畜牧兽医 》 2025 北大核心

摘要：【目的】确定云南宜良地区某养殖场疑似患伪结核病病羊的病原，并探究其耐药性及致病性，为该病的诊断和治疗提供理论依据。【方法】通过患病羊临床症状初步判断病因，无菌采集病料，分离纯化病原菌后对其形态特征、培养特性和生化特性进行鉴定；利用PCR扩增分离株16S rRNA基因序列并进行测序比对分析；通过药敏试验、耐药基因检测和小鼠致病性试验探究分离株的耐药性和致病性。【结果】分离株在血琼脂平板上生长状态良好，菌落呈黄白色、不透明样，在普通营养琼脂和普通营养肉汤内生长不良；革兰染色镜检结果显示，菌体为球杆状或棒状，为革兰阳性菌。生化鉴定结果显示，分离株的葡萄糖、尿素试验呈阳性，乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、西蒙氏枸橼酸盐、硫化氢、靛基质、硝酸盐还原试验、甲基红（MR）试验和VP试验均呈阴性。16S rRNA序列比对结果显示，分离株与NCBI数据库中的伪结核棒状杆菌16S rRNA基因序列相似性>99%,鉴定其为伪结核棒状杆菌。药敏试验结果显示，分离株对链霉素、庆大霉素、新霉素表现中介，对氨曲南、头孢他啶、多黏菌素表现耐药。耐药基因检测结果显示，该分离株携带耐药基因Sul2、Sul3、bla_TEM及bla_CTX-M。动物致病性试验结果显示，腹腔、皮下接种4.4×10～8 CFU/mL分离菌后可引起小鼠死亡，死亡率达100%。皮下接种96 h后可见小鼠皮下出现脓肿，脓液中可分离出伪结核棒状杆菌。【结论】本试验成功分离鉴定出1株羊源伪结核棒状杆菌，明确了患病羊病原，该分离株对小鼠致病性较强。研究结果为伪结核棒状杆菌感染羊的诊断、流行病学调查以及治疗提供参考依据。

关键词： 山羊 伪结核棒状杆菌 分离鉴定 耐药性