科研产出
青稞酵母双杂文库的构建及HVUL0H33228.2互作蛋白的筛选
《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD
摘要:白粉病是青稞生产中危害最为严重的病害之一,会造成产量严重下降。本实验室前期筛选到一个白粉菌诱导后上调表达的NF-YB转录因子HVUL0H33228.2。为了进一步明确该基因的作用机制,本研究构建了青稞受白粉菌诱导的酵母双杂交cDNA文库,以HVUL0H33228.2为诱饵进行酵母双杂交筛选。结果表明:所获得的cDNA文库滴度为5.6×10~8CFU/mL,插入片段长500~2 000 bp,重组率为94%,符合酵母双杂文库质量要求。利用酵母双杂交系统在该文库中筛选到6个与HVUL0H33228.2相互作用的蛋白,分别为铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶、核酮糖二磷酸羧化酶、叶绿素a/b结合蛋白2和6、光合系统Ⅱ反应中心蛋白CP43和醛缩酶型TIM桶家族蛋白。本研究为进一步揭示HVUL0H33228.2应答白粉菌侵染的分子机制提供了参考依据。
关键词: 青稞 白粉病 cDNA文库 HVUL0H33228.2 互作蛋白
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青稞HVUL1H08544.2基因特性分析及互作蛋白筛选
《西藏农业科技 》 2021
摘要:为了进一步探究青稞HVUL1H08544.2基因的生物学功能,对该基因进行了基本生物学特性分析和互作蛋白鉴定。结果显示,HVUL1H08544.2基因编码236个氨基酸,相对分子量为58.26 kD,包含一个HLH保守结构域,属于bHLH转录因子。利用同源重组的方法成功构建了诱饵载体pGBKT7-HVUL1H08544.2,通过酵母双杂交系统筛选青稞白粉菌诱导的cDNA文库,共鉴定到5个与HVUL1H08544.2互作的蛋白,分别为核酮糖二磷酸羧化酶、叶绿素a-b结合蛋白、叶绿体茎环结合蛋白、抗增殖蛋白、茉莉酸诱导蛋白。该结果对后续青稞应答白粉菌侵染的机制研究具有重要参考价值。
关键词: 青稞 白粉菌 HVUL1H08544.2 互作蛋白
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